NGS 次世代基因定序之高通量分析檢測
作為首批能提供NGS (Next Generation Sequence) 次世基因定序的服務商之一,Eurofins Genomics藉著卓越的專業知識,服務涵蓋當今廣泛的應用,從而塑造了NGS檢測的未來。
歐陸基因事業體在樣本製備(sample preparation)、樣本庫製備(library preparation)、樣本庫擴增和數據分析方面的技術能力可滿足客戶個人化的需求,助於拓展基因體研究的廣度與深度,並且加速了精準醫療的實現。
Eurofins Genomics成為歐洲第一家使用Roche / 454 GS20提供NGS服務的公司。 Eurofins不斷納入各種先進之NGS測序技術。
- Illumina HiSeq 2500 / MiSeq用於超深度測序(ultra-deep sequencing),可輸出巨大的數據量
- PacBio RSII用於從頭測序de novo sequencing
- Roche GS FLX ++和GS Junior可提供出色的擴增子數據和類似Sanger的讀數
- Life Technologies' Ion Proton適用於小型項目,turnaround時間短,尤其於測序外顯子時。
NGS於食品與環境之應用:
1. Non-target 非指定之細菌菌群篩選 (微生物社群分析)
該測試可用於各種食品和飼料的樣品(例如: 發酵產品、成熟分析、變質分析、病原體分析),也可用於環境樣品,例如: 土壤、水和糞便以及混合菌落mixed colonies。
該方法之檢測步驟
從樣品中分離出總DNA,藉由PCR擴增細菌16S rDNA區域的片段。 經過多次質量控制後,使用Illumina MiSeq平台對PCR產物進行測序。 經過生物資訊數據評估(包括拷貝數校正)後,將樣本序列與公共數據庫NCBI(國家生物技術資資訊中心)的核苷酸序列比對,識別樣品中的細菌。
與經典測序方法之區別
針對鑑定純細菌菌落,可使用Sanger測序之技術。 此技術較適用於檢測來自單一種微生物之DNA。 一旦樣本中存在潛在的多種混合微生物,多元及NGS高通量之檢測技術則為推薦檢驗方法之首選。
樣品分析結果將呈現如下:
Sample | Bacteria (lat.) | Reads [%]* |
[Sample Code] | Lactobacillus sp. | 99.2 |
Pseudomonas | 0.8 |
不能檢測到哪些物種(=偽陰性)?
在公共數據庫中沒有序列建檔的物種將不會被檢測出來,故有可能導致偽陰性結果。若您已知樣品中可能含有稀有或非尋常之細菌菌種,請先與實驗室聯繫,我們可提前檢查該細菌種類的數據庫狀態。
此檢測有涵蓋在ISO 17025認證範圍
2. 食品微生物汙染等來源追溯
有助於避免更嚴重的汙染,在產品召回前,調整食品加工和衛生策略
基因體資料能協助客戶回答以下的問題:
- 污染是否從同一來源,還是有多個來源之可能性?
- 單一事件污染是否已引發群突發(outbreak)?
- 污染能否追溯到某個供應商/來源嗎?
3. 真實性檢測
如需更多資訊或有任何疑問,歡迎與我們聯繫!